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技術文章

冷凍干燥機在藍耳病病毒標準物質(zhì)研究中的應用點擊次數(shù):1634 更新時間:2018-10-08

豬藍耳病又名豬流行性流產(chǎn)和呼吸綜合征,該病病原體為Lelysted病毒,呈卵形、有囊泡、直徑在40-60 nm之間,表面有約5 nm大小凸起,基因組為單股正鏈RNA病毒,該病毒PRRSV基因組具有較強的變異性,傳染性強具有地方流行性,我國將其列為二類傳染病,在防治該病的過程中首先需要快速診斷和檢測藍耳病病毒,在檢測藍耳病病毒時需要統(tǒng)yi的標準物質(zhì)。

 

實驗設備

冷凍干燥機FDU-1200

冷阱溫度-45 ℃

除濕量1 L

采用便捷式設計、可置于實驗桌上,操作簡單可分別采用手動和自動運行模式,方便科研人員開展大量的實驗工作。

 

實驗過程

將滅活后的病毒液制備藍耳病病毒核酸檢測標準物質(zhì),將純化后的病毒進行無菌檢測、外源性病毒檢測。

 

第二步

將凍干保護劑與藍耳病病毒液混合搖勻后,移液分裝至10支容量為3 mL的具十字橡膠塞的無菌瓶中(十字塞的十字部分插入瓶中,塞冒懸于瓶口),每支1 mL試樣。

 

圖片3.png

 

 

第三步

10支分裝好的試樣瓶置于-80 ℃的預凍30 min后取出,預凍后樣品瓶置于冷阱溫度已達-45 ℃的凍干倉中,運行真空泵開始凍干,一直到樣品質(zhì)量不發(fā)生變化時凍干結(jié)束并在真空狀態(tài)下壓蓋密封十字橡膠塞,得到凍干后的樣品。

圖片4.png

 

第四步

采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測藍耳病病毒標準物質(zhì)的均勻性、穩(wěn)定性,得到藍耳病病毒檢測標準物質(zhì)也為該病毒定性和定量檢測提供標準物質(zhì)。

圖片5.png

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